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厭氧培養(yǎng)箱如何置換氧氣

2024-10-20 類型:技術(shù)支持
厭氧培養(yǎng)箱的氧氣置換是一個關(guān)鍵步驟,以確保培養(yǎng)箱內(nèi)部形成無氧或低氧環(huán)境,從而滿足厭氧微生物的生長需求。以下是一個詳細的置換氧氣步驟:

厭氧培養(yǎng)箱的氧氣置換是一個關(guān)鍵步驟,以確保培養(yǎng)箱內(nèi)部形成無氧或低氧環(huán)境,從而滿足厭氧微生物的生長需求。以下是一個詳細的置換氧氣步驟:

一、準備階段

  1. 放置附件和器具:按使用要求放置好必要的附件和器具。
  2. 開啟電源和照明:通電源開照明燈,開啟溫控儀,調(diào)節(jié)至所需溫度。
  3. 放入干燥劑和指示紙:在操作室內(nèi)放入干燥劑和美蘭指示紙(封閉狀態(tài)),用于檢測氧氣含量和濕度。

二、氮氣置換階段

  1. 密封手套:將乳膠手套套在觀察板法蘭圈上并扎緊,以防止氣體泄漏。
  2. 氮氣進氣:接通氮氣進氣路,打開氮氣控制閥,使手套鼓起,然后關(guān)閉閥門,并再次扎緊袋口。
  3. 重復(fù)置換:重復(fù)上述充氮過程,至少進行兩次氮氣置換。每次置換前,應(yīng)確保取樣室先抽真空,并用腳踏開關(guān)開閉排氣。

三、混合氣體置換階段

  1. 調(diào)整混合氣體:混合氣體通常包含氮氣(N2)、氫氣(H2)和二氧化碳(CO2),按一定比例(如N2 85%、H2 10%、CO2 5%)混合。
  2. 混合氣體進氣:調(diào)換氣路,打開混合氣閥進氣。充氣時,取樣室應(yīng)先抽真空,并隨時用腳踏開關(guān)開閉排氣。
  3. 調(diào)整流量計:關(guān)掉混合氣體閥后,打開另一閥門,使混合氣體經(jīng)過流量計。調(diào)整流量計,使流量控制在每分鐘10ml左右。
  4. 重復(fù)置換:重復(fù)上述混合氣體置換過程2~3次,以確保操作室內(nèi)形成穩(wěn)定的厭氧環(huán)境。

四、后續(xù)處理

  1. 催化除氧:打開操作室內(nèi)的除氧催化器電源,進行催化除氧。一小時后,打開美蘭指示紙觀察其顏色變化,如不變色則表明操作室內(nèi)已達到厭氧環(huán)境。
  2. 滅菌處理:開啟紫外線燈,對操作室內(nèi)進行滅菌處理。滅菌時間可根據(jù)具體實驗要求自定。

五、注意事項

  1. 氣體壓力控制:在置換過程中,應(yīng)嚴格控制氣體的輸入壓力,以防爆管或損壞設(shè)備。
  2. 定期檢查:連續(xù)使用厭氧培養(yǎng)箱時,應(yīng)定期檢查和補充除氧劑和干燥劑,確保室內(nèi)厭氧條件的維持。
  3. 安全操作:在操作過程中,應(yīng)嚴格遵守安全操作規(guī)程,防止氣體泄漏或設(shè)備損壞。

通過以上步驟,可以有效地將厭氧培養(yǎng)箱內(nèi)的氧氣置換出去,為厭氧微生物的生長提供一個適宜的無氧或低氧環(huán)境。

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